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________LABORATORIO________
Trypanosomi tra il buffy–coat e il plasma.

ESAME
Ricerca Trypanosoma MHT
(Micro Hematocrit Tubes)
Osservazione microscopica a fresco di un Trypanosoma.

L’esame tramite capillare da ematocrito si basa sul principio della forza centrifuga la quale fa in modo che, un corpo che si ponga in movimento circolare ad alta velocità genera una forza che lo allontana dal centro del circolo. La stratificazioni degli elementi oltre alla forza centrifuga che si applica è in funzione della densità e del volume degli stessi e della viscosità del liquido di sospensione. In un sangue centrifugato in capillare la concentrazione degli eventuali tripanosomi è tra il buffy–coat e il plasma.
  
  METODO MHT
(Micro Hematocrit Tubes)
    
   Procedimento
 
 Indossare i guanti.
    
 
 Sangue venoso raccolto in K2EDTA.
Mescolare per inversione la provetta del campione per ≈15”.
    
 
 Prendere un capillare.
    
 
 Riempirlo per capillarità circa fino al trattino indicatore.
    
 
 Far retrocedere il sangue di alcuni mm e con il dito indice tappare l’estremità opposta del capillare.
    
 
 Disinfettare il capillare esternamente.
    
   Continuando a tenere tappata l’estremità del capillare appoggiare l’estremità libera sulla plastilina.
    
   Affondare il capillare nella plastilina un paio di volte togliendo contemporaneamente il dito che teneva tappata l’altra estremità.
    
   Ripetere la stessa procedura con altri capillari posizionandoli nell’apposito supporto.
    
   Centrifugare i capillari a 12.000 giri per 5 minuti.
    
   A un vetrino portaoggetti tagliato applicare alle due estremità per tutta la sua larghezza del nastro biadesivo.
    
   Posizionare i capillari uno accanto all’altro sul vetrino in modo che le loro estremità poggino sul nastro biadesivo così rimarranno allo stesso.
    
   Poggiare un vetrino coprioggetto 24x32 sui capillari in modo da coprire la zona buffy coat.
    
 
 Con una siringa ipodermica aggiungere molto delicatamente soluzione fisiologica nello spazio intercapillare tra vetrino portaoggetto e coprioggetto fino a che lo spazio in prossimità del buffy coat sia immerso nel liquido.
   Lettura
 
 Procedere all’osservazione microscopica tra il buffy–coat e il plasma.


Esame Trypanosoma (Hto)
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