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________LABORATORIO________
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ESAME
COPROCOLTURA SU AGAR
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| | Metodo indicato per Strongyloides stercoralis, Strongyloides fuelleborni, Necator americanus, Ancylostoma duodenale, Trichostrongylus sp, Ternidens deminutus e Oesophagostomum sp.
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| | Terreno di coltura
- Agar..........................1,5%
- Meat extract...............0,5%
- Peptone.....................1,0%
- NaCl..........................0,5%
Far asciugare l'agar lasciando le piastre sotto cappa a flusso laminare (in alternativa a temperatura ambiente) per 3-4 giorni prima di stoccarle a 4-5°C.
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Prima di seminare lasciare le pistre a temperatura ambiente per 3/4 ore.
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Campione
Circa 50 gr di feci fresche emesse entro le 24 ore.
Non refrigerare il campione.
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Aggiungere soluzione fisiologica.
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Aggiungere carbone vegetale pari a circa metà del volume iniziale.
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Mescolare.
Si deve arrivare ad una sospensione cremosa; eventualmente aggiungere dell'altra soluzione fisiologica.
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Al centro di ogni piastra stendere circa 6/7 gr di campione.
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Per aumentare la sensibilità del metodo si consiglia di seminare più piastre.
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Con del nastro adesivo legare assieme tutte le piastre.
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Mettere le piastre in un contenitore.
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Incubare al buio a circa 26°C per 48 ore.
Leggere le piastre.
Nel caso di un risultato dubbio prolungare l'incubazione per ulteriori 72 ore avendo cura di osservarle giornalmente.
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In caso di positività:
aggiungere formalina al 2,5%.
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Lasciare agire la formalina per circa 30' esercitando di tanto in tanto alcuni movimenti rotatori.
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Con una pipetta Pasteur aspirare tutto il liquido.
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Mettere il liquido in provette da centrifuga a fondo conico.
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Centrifugare a 2000 rpm per 3'.
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Risospendere il sedimento e osservarlo al microscopio.
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